紫外可見分光光度計原理是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，它對光能的吸收是不一樣的，因此，每一種物質(zhì)都有自己獨特的、固定的吸收光譜曲線，可以根據(jù)吸收光譜的某些特征波長在吸收高度處辨別或測定物質(zhì)的含量，這是分光光度法定性和定量分析的基礎(chǔ)。 　　

(1)預(yù)熱是保證儀器準確穩(wěn)定的重要步驟。 　　

(2)試管的潔凈度直接影響實驗結(jié)果。因此，應(yīng)清洗試管。用自來水反復(fù)沖洗用過的試管，用蒸餾水沖洗，倒置在濾紙片上，干燥后回收試管。如有必要，應(yīng)對試管進行更精細的處理，如用濃硝酸或鉻酸洗液浸泡，然后沖洗。 　　(3)比色皿與分光光度計應(yīng)配套使用,否則會引起較大的實驗誤差.比色皿不能單個調(diào)換1.37200型光柵分光光度計的使用注意事項。 　　

(4)比色皿內(nèi)盛液應(yīng)為其容量的2/3,過少會影響實驗結(jié)果,過多易在測量過程中外溢,污染儀器.比色皿中試樣裝入量應(yīng)為2/3～3/4之間。 　　

(5)拿放比色皿時,應(yīng)持其"毛面",杜絕接觸光路通過的"光面".如比色皿外表面有液體,應(yīng)用綢布拭干,以保證光路通過時不受影響。 　　

(6)如果待測溶液的濃度過大，應(yīng)選用光學(xué)直徑較短的試管，一般應(yīng)使紫外可見分光光度計的吸光度讀數(shù)在0.1 ~ 0.8的范圍內(nèi)為宜。由于測定空白、標準品和待測溶液時使用相同光學(xué)直徑的試管，所以不必考慮光學(xué)直徑變化所造成的影響。

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